01 DNase與RNase特性與來

DNase和RNase是分別特異性降解DNA和RNA的水解酶。它們通過切斷核酸分子中的磷酸二酯鍵使核酸鏈斷裂，導(dǎo)致降解。RNase因其二硫鍵結(jié)構(gòu)而具有極高的穩(wěn)定性，能夠抵抗高溫煮沸甚至變性劑，在失活后還可重新折疊恢復(fù)活性，這使得它成為RNA相關(guān)實(shí)驗(yàn)的頭號天敵。污染來源主要分為兩大類：

? 實(shí)驗(yàn)人員：皮膚、汗液、唾液（飛沫）和頭發(fā)均含有大量核酸酶。
? 實(shí)驗(yàn)器材：移液器、吸頭、離心管、玻璃器皿、實(shí)驗(yàn)臺(tái)面及儀器按鍵等若未妥善處理，極易附著核酸酶。
? 試劑與水：普通蒸餾水或去離子水以及化學(xué)試劑在生產(chǎn)儲(chǔ)存過程中可能受到污染。
? 空氣中灰塵微粒：可攜帶核酸酶落入開放放置的試劑或樣本中。

? 內(nèi)源性污染是指樣本自身攜帶的核酸酶，所有生物組織和細(xì)胞樣品均含有內(nèi)源性核酸酶。一旦樣本離開活體或其原有生長環(huán)境，內(nèi)源酶便會(huì)開始降解RNA/DNA。降解速度取決于內(nèi)源酶含量和所處環(huán)境溫度。例如，肝臟、胰腺、脾臟、胸腺、腦組織以及植物組織等均含有豐富的內(nèi)源核酸酶，若處理不當(dāng)，核酸會(huì)迅速降解。

針對這些潛在風(fēng)險(xiǎn)，選擇可靠的無酶耗材是防控污染的第一步。愛津生物所有產(chǎn)品——從離心管、吸頭、深孔板到PCR板、細(xì)胞培養(yǎng)系列等均在十萬級無塵車間內(nèi)生產(chǎn)制造，出廠前經(jīng)嚴(yán)格檢測，確保無DNase/RNase污染、無熱原、無PCR抑制劑。讓科研人員能夠安心專注于實(shí)驗(yàn)本身，而非擔(dān)憂外源風(fēng)險(xiǎn)。

02 建立無DNase無RNase實(shí)驗(yàn)環(huán)境

盡可能設(shè)立用于RNA/DNA操作的專用超凈工作臺(tái)或區(qū)域。定期使用核酸酶清除劑擦拭臺(tái)面和儀器表面。這些清除劑能有效使核酸酶失活，且通常無毒無腐蝕性，使用后需用無酶水擦拭去除殘留。

玻璃與金屬器皿，可通過干烤滅菌法，或使用核酸酶清除劑處理，后者更為便捷安全。

優(yōu)先選購商業(yè)化的、無DNase/RNase的耗材，開包即用，更加可靠安全。

愛津生物所有耗材產(chǎn)品均通過ISO13485質(zhì)量管理體系和CE認(rèn)證，生產(chǎn)基地面積達(dá)26000㎡，配備5500㎡十萬級、500㎡萬級無塵車間，嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)流程生產(chǎn)與質(zhì)控，可為實(shí)驗(yàn)人員提供真正“開包即用”的無酶耗材保障。

實(shí)驗(yàn)前佩戴干凈的無粉手套和口罩。接觸任何潛在污染源（如門把手、電話、自己的皮膚或頭發(fā)）后應(yīng)立即更換手套，操作RNA樣本時(shí)盡量避免說話。

在所有涉及試劑的步驟中最好都選用帶濾芯的吸頭，其高效過濾和強(qiáng)疏水性可有效防止氣溶膠污染移液器內(nèi)部，避免交叉污染。

任何時(shí)候懷疑有污染可能，應(yīng)立即更換手套、離心管及吸頭。將試劑進(jìn)行小份分裝，每次實(shí)驗(yàn)使用單獨(dú)的分裝瓶，避免反復(fù)取用導(dǎo)致整瓶試劑被污染。

針對內(nèi)源性污染，關(guān)鍵在于快速有效地抑制樣本中核酸酶的活性。

“ 樣本的快速處理與妥善保存 ”

樣本采集后應(yīng)盡快處理。若無法立即提取核酸，必須采取快速冷凍措施（如直接投入液氮），以最大限度地減少RNA/DNA的降解。對于組織樣本，液氮碾磨是破碎組織并同步抑制內(nèi)源酶最有效的方法。

有效保護(hù)樣本RNA不被內(nèi)源酶降解，如RNAlater等。

在核酸提取階段，應(yīng)使用能迅速滅活內(nèi)源核酸酶的裂解液。對于內(nèi)源酶含量高的組織（如肝臟、胰腺、植物組織等），推薦使用含苯酚的裂解液，以增強(qiáng)滅活能力。電動(dòng)勻漿器與液氮碾磨配合使用，能確保組織細(xì)胞被快速、徹底地勻漿，使裂解液中的有效成分立即抑制住細(xì)胞內(nèi)核酸酶。

愛津生物提供多種規(guī)格離心管及儲(chǔ)液耗材，為不同樣本類型提供匹配解決方案，從樣本處理到核酸提取全程防污染。

建議選用無DNase/RNase的試劑和超純水。

對于自配試劑，務(wù)必使用無酶水和經(jīng)過處理的器皿配制。

愛津生物所有耗材均無DNase/RNase污染、無熱原、無PCR抑制劑，可放心用于高靈敏核酸實(shí)驗(yàn)。

03 無DNase/RNase環(huán)境檢驗(yàn)

定期檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室無DNase/RNase環(huán)境，同樣關(guān)鍵。

用待驗(yàn)證的水或緩沖液孵育一段完整的RNA或DNA標(biāo)準(zhǔn)片段，一段時(shí)間后通過瓊脂糖凝膠電泳觀察。

條帶清晰表明無污染，出現(xiàn)拖尾或條帶消失則表明存在降解。

使用商品化的高靈敏度熒光底物檢測試劑盒，可以快速、定量地檢測出極微量的RNase或DNase活性，有助于精準(zhǔn)定位污染源。

04 核酸酶污染應(yīng)急處理

一旦懷疑或確認(rèn)核酸酶污染：

丟棄可能污染的吸頭、離心管等實(shí)驗(yàn)室耗材，啟用新批次試劑。

使用專用核酸清除劑擦拭臺(tái)面、儀器，并對實(shí)驗(yàn)區(qū)域進(jìn)行紫外線照射。

愛津生物的耗材產(chǎn)品系列覆蓋900余種，包括深孔板、移液吸頭、管柱類、儲(chǔ)液槽、PCR系列、細(xì)胞培養(yǎng)類等，全面滿足不同實(shí)驗(yàn)場景的無酶防控需求，為實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建持久穩(wěn)定的潔凈體系。

05 選擇愛津 選擇品質(zhì)

維持無DNase/RNase環(huán)境，是確保分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠的基礎(chǔ)。這不僅依賴于實(shí)驗(yàn)人員的規(guī)范意識，更需要通過可靠的實(shí)驗(yàn)耗材予以保障。